產(chǎn)品組分
組分
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性狀
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存儲條件
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規(guī)格
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A:英光GelMA
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海綿狀
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-20°℃,避光
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0.5 g/瓶
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B:光引發(fā)劑LAP
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白色粉末狀
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室溫,避光
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0.025 g/瓶
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產(chǎn)品熒光信息
型號
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激發(fā)波長
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發(fā)射波長
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熒光顏色
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GM-xx-RF
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-550 nm
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-610 nm
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紅
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GM-x0-GF
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~490 nm
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~520 nm
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綠
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材料簡介
甲基丙烯;髂z(GelMA)為雙鍵改性明膠,其可通過紫外及藍光固化成膠。GelMA光固化水凝膠兼具天然和合成生物材料的特性,其具有適于細(xì)胞生長和分化的三維結(jié)構(gòu)。熒光 GelMA是在GelMA分子上化學(xué)接枝熒光分子,通過改變熒光分子類型而使其具有特定的熒光顏色。此化學(xué)標(biāo)記方法避免了物理混合或靜電吸附等方法中熒光分子容易擴散出體系的缺點,同時也避免了熒光微粒成像不均的缺點。該熒光GelMA具有良好生物相容性,在體內(nèi)外成像、示蹤、材料降解、生物傳感及3D打印工藝等領(lǐng)域有廣闊的應(yīng)用前景。
產(chǎn)品應(yīng)用
材料示蹤、體內(nèi)外熒光成像、細(xì)胞培養(yǎng)、包被、生物3D打印、組織工程等。儲存及運輸
干態(tài):-20℃避光,6個月,可常溫運輸。溶液:∶4℃避光,7天;-20℃避光,3個月;溶液反復(fù)凍融會影響產(chǎn)品性能,盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
溶液配制
1配制0.25% (w/v)引發(fā)劑標(biāo)準(zhǔn)溶液
(1)取10ml PBS,加入裝有引發(fā)劑IAP的棕色瓶中(內(nèi)含0.025g LAP)。(2)以40-50℃水浴加熱溶解15分鐘.期間振蕩數(shù)次。
該LAP標(biāo)準(zhǔn)液在4℃避光條件下可保存12個月。
⒉配制熒光 GelMA溶液〈建議熒光GelMA濃度為5-30% (w/v))
(1)取所需質(zhì)量的熒光GelMA放入離心管。
(2)取引發(fā)劑標(biāo)準(zhǔn)溶液加入到上述的離心管中,振蕩使GelMA充分浸潤。(3)l以40-50℃水浴避光加熱溶解30分鐘,期間振蕩數(shù)次。
(4)將GelMA溶液立即用0.22um無菌針頭過濾器滅菌(防止低溫凝膠化)。二維細(xì)胞培養(yǎng)建議
將熒光GelMA溶液于37°℃水浴保溫備用(防止低溫凝膠化)。
趁熱將熒光GelMA溶液注入孔板(96孔板:50~10CL/孔L、48孔板: 100~300puL孔, 24孔板:300-500L/孔L)。
以405nm光源,輻照10-30秒使凝膠化, 可通過光照時問及強度調(diào)控凝膠強度。>將培養(yǎng)基加入孔中覆蓋凝膠,置于37℃培養(yǎng)箱中5分鐘,清洗樣品,吸去培養(yǎng)基。將細(xì)胞懸浮液加入到孔板中即可。根據(jù)實驗設(shè)計進行培養(yǎng)基更換、觀察拍照等操作
(操作程序無特殊要求)。
三維細(xì)胞培養(yǎng)建議
>收集細(xì)胞并用37℃預(yù)熱的熒光GelMA溶液重懸,配制細(xì)胞懸液。>向孔板中加入細(xì)胞懸浮液。
(96孔板: 50~10QuL/孔, 48孔板:100~300uL/L,24孔板:300~500uL/L)。以405nm光源,輻照10-30秒使凝膠化, 可通過光照時間及強度調(diào)控凝膠強度。提示:加入一孔固化一孔,防止細(xì)胞沉淀。
》向各孔加入培養(yǎng)基.于37℃培養(yǎng)箱中5分鐘.清洗樣品,移去培養(yǎng)基。
加入新鮮培養(yǎng)基并長期培養(yǎng)。根據(jù)實驗設(shè)計進行培養(yǎng)基更換、觀察拍照、免疫熒光染色等操作〈操作程序無特殊要求)。
*注:在配制不同濃度熒光 GelMA 時,濃度越高,相應(yīng)熒光強度越高,若要降低熒光強度,可將熒光 GelMA與普通 GelMA按一定比例混合使用。
★溫馨提示:請勿直視固化光源。
熒光水凝膠是一種自發(fā)熒光的高分子材料,具有可調(diào)的熒光顯色效果,因而在3D打印、生物傳感、熒光示蹤、仿生驅(qū)動等研究領(lǐng)域有廣闊的應(yīng)用前景。
團隊研制的GelMA水凝膠具有固化速度快、生物兼容性優(yōu)異等優(yōu)點,已被哈佛、劍橋、麻省理工、香港理工、清華、北大、浙大等國內(nèi)外高校的100多個課題組使用,研究成果已發(fā)表于Materials Horizons( IF=14.356 ),Small( IF=10.856 ),Biosensors and Bioelctronics( IF=9.518 ),Biofabrication( IF=7.236 )等期刊。
是否可以讓GelMA保持穩(wěn)定,同時具有熒光特性?
團隊持續(xù)攻關(guān),成功研發(fā)出了自帶熒光的GelMA水凝膠(BKNM-GM-GF/BKNM-GM-RF系列)。
一、熒光GelMA簡介
團隊研發(fā)的熒光GelMA是通過在GelMA上“嫁接”熒光分子實現(xiàn)的,因所嫁接熒光分子不同而具有特定的熒光顏色。此化學(xué)標(biāo)記方法避免了物理混合或靜電吸附等方法中熒光分子容易擴散出體系的缺點,,同時也避免了熒光微粒成像不均的缺點。
二、熒光GelMA優(yōu)點
1.熒光GelMA成像均勻。下圖為自帶熒光和混熒光微球的兩種GelMA成像對比,熒光GelMA成像均勻連續(xù),混熒光微球GelMA表面顆粒感明顯。
2.熒光GelMA穩(wěn)定不擴散。下圖為自帶熒光和混熒光分子的兩種GelMA擴散對比;鞜晒夥肿拥腉elMA容易擴散;自帶熒光GelMA能長時間保持熒光特性。
3.熒光GelMA生物相容性優(yōu)異。下圖為使用熒光GelMA和普通GelMA培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞(RBE4)和骨干細(xì)胞(BMSC)第五天時的生長狀態(tài),熒光GelMA與普通GelMA具有同等優(yōu)異的生物相容性。
三、熒光GelMA應(yīng)用案例
1.3D打印。近年來,GelMA已成為生物3D打印的明星墨水,熒光GelMA可使打印結(jié)構(gòu)的表征更加清晰穩(wěn)定。團隊研制的熒光GelMA可應(yīng)用于全品類生物3D打印機,下圖為BKNM-BP系列生物3D打印機制造的熒光酷炫結(jié)構(gòu)。
2.熒光示蹤。使用熒光GelMA,可方便追蹤GelMA或其他載體在體內(nèi)的變化情況。自帶熒光GelMA不會在體內(nèi)擴散,可真實地追蹤熒光物質(zhì)的分布情況。
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